熒光顯微鏡原理
- 大多數(shù)細(xì)胞成分是無(wú)色的，在顯微鏡下無(wú)法清楚地區(qū)分。熒光顯微鏡的基本前提是用染料對(duì)組分進(jìn)行染色。
- 熒光染料，也稱為熒光團(tuán)或熒光染料，是吸收給定波長(zhǎng)（通常為UV）的激發(fā)光，并在短暫的延遲后發(fā)出更長(zhǎng)波長(zhǎng)的光的分子。吸收和發(fā)射之間的延遲可以忽略不計(jì)，通常約為納秒。
- 然后可以從激發(fā)光中濾出發(fā)射光以揭示熒光團(tuán)的位置。
- 熒光顯微鏡使用強(qiáng)度更高的光照射樣品。該光激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)，然后發(fā)出更長(zhǎng)波長(zhǎng)的光。
- 產(chǎn)生的圖像基于第二種光源或熒光物質(zhì)的發(fā)射波長(zhǎng)，而不是zui初用于照明和激發(fā)樣品的光。
加工
激發(fā)波長(zhǎng)的光通過物鏡聚焦在樣品上。樣品發(fā)出的熒光通過物鏡聚焦在檢測(cè)器上。由于大多數(shù)激發(fā)光都透射過樣品，因此只有反射的激發(fā)光與發(fā)射光一起到達(dá)物鏡。
形式
“熒光顯微鏡”是指使用熒光生成圖像的任何顯微鏡，無(wú)論是諸如落射熒光顯微鏡這樣的更簡(jiǎn)單的裝置，還是諸如共焦顯微鏡之類的更復(fù)雜的設(shè)計(jì)，其都使用光學(xué)切片來獲得更好的分辨率。熒光圖像。
使用的大多數(shù)熒光顯微鏡是落射熒光顯微鏡，其中熒光團(tuán)的激發(fā)和熒光的檢測(cè)是通過相同的光路（即通過物鏡）完成的。
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